динамикалық BIOSENSORS heliXcyto қалыпқа келтіру шешімі
Негізгі мүмкіндіктер
- heliX циточипінің 1 және 2 нүктелеріндегі флуоресцентті сигналдарды қалыпқа келтіру үшін
- RT-IC өлшемдері кезінде қызыл немесе жасыл флуоресцентті сигналдарға нақты уақытта дұрыс сілтеме жасауға мүмкіндік береді.
- Барлық heliX cyto чиптерімен үйлесімді
- Нормализация ерітіндісі-Ra бір оң заряды бар орташа гидрофильді қызыл бояуды алып жүреді
- Нормализация ерітіндісі-Ga бір теріс таза заряды бар гидрофильді жасыл бояуды тасымалдайды
Өнім сипаттамасы
Тапсырыс нөмірі: NOR-0
1-кесте. Мазмұны және сақтау ақпараты
| Материал | Қақпақ | Шоғырлану | Сома | Сақтау |
| Нормализация ерітіндісі-Ra | Апельсин | 10 мкм | 3x 100 мкл | -20 °C |
| Нормализация ерітіндісі-Га | Жасыл | 10 мкм | 3x 100 мкл | -20 °C |
Тек зерттеуге арналған.
Бұл өнімнің жарамдылық мерзімі шектеулі, жапсырмадағы жарамдылық мерзімін қараңыз.
Дайындық
Анықталатын зат белгісінің түсіне сәйкес қалыпқа келтіру ерітіндісінің түсін (Ga немесе Ra) таңдаңыз. 10 мкМ қалыпқа келтіру ерітіндісін жұмыс істейтін буфері бар жұмыс концентрациясына дейін сұйылтыңыз.
Экспериментке қажетті соңғы көлемді heliOS жүйесінде табуға боладыampнауа view талдау туралы.
Қалыпқа келтіру ерітіндісінің концентрациясы өлшенетін ең жоғары талданатын зат концентрациясындағы флюорофор концентрациясына шамамен сәйкес келуі керек. Оны келесі теңдеу арқылы есептеуге болады:
: Қалаған түсте қалыпқа келтіру ерітіндісінің концентрациясы
: Белгіленген талданатын ерітіндідегі бояғыштың концентрациясы
: Өлшенуі тиіс талданатын заттың ең жоғары концентрациясы
: Таңбалау дәрежесі (бояғыштың талданатын затқа қатынасы)
Сұйылтылған ерітінділерді 2-8°С температурада 7 күнге дейін сақтауға болады.
МАҢЫЗДЫ: Қос түсті өлшемді (жасыл және қызыл арнаның параллель оқуы) орнатпасаңыз, Нормализация ерітіндісі-Ra және Нормализация ерітіндісі-Ga-ны бірге араластырмаңыз.
Қолданба ескертпесі
RT-IC өлшеу кезінде нормалау ерітіндісінің флуоресцентті сигналы а-да болуы керек ұқсас диапазон байланысқан талданатын заттан келетін ең жоғары сигнал ретінде (шикі деректер).
Абсолютті флуоресцентті сигнал қалыпқа келтіру ерітіндісінің концентрациясына және өлшеу кезінде қолданылатын қозу қуатына байланысты. Қоздыру қуатын келесі параметр негізінде таңдау керек:
a. Анықталатын зат ерітіндісіндегі флюорофор концентрациясы:
Флюорофор концентрациясы өлшеу кезінде қолданылатын талданатын заттың концентрациясына, сондай-ақ талданатын заттың таңбалану дәрежесіне байланысты. Жоғары DOL және жоғары аналит концентрациясы үшін қозу қуатын төмендету қажет болуы мүмкін.
b. Күтілетін байланыс сигналы:
Жасушадағы жоғары экспрессиялық нысандар таңбаланған талданатын заттың көбірек молекулаларын байланыстыра алады. Жоғары шамадан тыс нысана болған жағдайда күшті байланыстыру сигналын күтуге болады. Ысырманың жабылуын болдырмау үшін қоздыру қуатын төмендету қарастырылуы мүмкін.
c. Чип түрі:
Әртүрлі чип түрлерінің флуоресцентті фоны әртүрлі. Тұзақтар неғұрлым үлкен болса және чиптегі тұзақтар соғұрлым көп болса, фондық сигнал соғұрлым жоғары болады. Сондықтан L5 чиптері M5 микросхемаларына қарағанда аз қозу қуатын қажет етуі мүмкін.
Қозу күші мен нормасының бастапқы нүктесі үшін. RT-IC тәжірибесінде қолданылатын ерітінді концентрациясы, 2 кестені қараңыз.
Кесте 2. HeliX cyto M5 чипі үшін қолайлы флюорофор концентрациясының, қалыпқа келтіру ерітіндісінің концентрациясының және қозу қуатының қатынасы
| Аналитті бояу конц. = талданатын зат конс x DOL | Қозу күші | Концентрацияны қалыпқа келтіру ерітіндісі | Сұйылтуды қалыпқа келтіру ерітіндісі |
| 25 нМ | 0.5 | 25 нМ | 1:400 |
| 50 нМ | 0.3 | 50 нМ | 1:200 |
| 100 нМ | 0.2 | 100 нМ | 1:100 |
| 300 нМ | 0.1 | 300 нМ | 1:33 |
| 500 нМ | 0.08 | 500 нМ | 1:20 |
| 1 мкм | 0.05 | 1 мкм | 1:10 |
| 2.5 мкм | 0.02 | 2.5 мкм | 1:4 |
Ескерту: Бұл кесте сізге нұсқау беру үшін. Дегенмен, heliX цитода жазылған соңғы сигнал көптеген факторларға байланысты. Осылайша, әрбір жүйе үшін кейбір оңтайландыру қажет болады.
Байланыс
| Dynamic Biosensors GmbH | Dynamic Biosensors, Inc. |
| Perchtinger Str. 8/10 | 300 Сауда орталығы, люкс 1400 |
| 81379 Мюнхен | Вобурн, MA 01801 |
| Германия | АҚШ |
Тапсырыс туралы ақпарат order@dynamic-biosensors.com
Техникалық көмек support@dynamic-biosensors.com
ТҰТЫНУШЫЛАРҒА ҚОЛДАУ
www.dynamic-biosensors.com
Құралдар мен чиптер Германияда жасалған және өндірілген.
©2024 Dynamic Biosensors GmbH | Dynamic Biosensors, Inc. Барлық құқықтар қорғалған.
Құжаттар / Ресурстар
 |
динамикалық BIOSENSORS heliXcyto қалыпқа келтіру шешімі [pdf] Пайдаланушы нұсқаулығы NOR-0, heliXcyto Нормализация ерітіндісі, heliXcyto, Нормализация ерітіндісі, Шешім |
